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酶标仪的维修实例和使用探讨
文章作者:detie 上传更新:2022-1-11 15:01:32

酶标仪的维修实例及使用探讨

酶标仪在实际应用中很广泛,如应用在临床鉴别乙肝两对半,HIV等很多方面。在临床实验方面应用在鉴定DNA等许多方面,可以说它是临床及医学实验不可或缺的基础设备。

故障一:测量的结果重现性不好,即使用空板测量误差也在允许的范围之外。

故障分析:检查试剂发现没有问题,检查判定公式也没有问题,检查光路也没有污染。几经周折终于发现卡微板的卡簧在伸缩后没有卡到位,造成微板在测量时在机内晃动影响测量结果不准。

故障二:测量结果OD值偏低。

故障分析:排除完灯的能量值偏低后,检查发现滤光片上有灰尘,用蒸馏水和擦镜纸擦洗干净晾干后故障排除。

测试方法:酶标仪的仪器指标在最佳状态,就仪器的精度测试和仪器的线性度介绍几种测试方法:

精度测试:该过程可被用于检测不同微板之间的测量精度。使用新制备的在0.1% TWEEN20中的橘黄色甲基填充微孔,在每个微孔中使用不同稀释度的溶剂以便获得一个光密度范围,首先确保每孔注入200mL液体,使用492nm虑光片测量至少3次,对每一微孔进行下列计算:(1)平均OD值;(2)最高和最低值;(3)平均值。最高和最低值之间的差值和百分比。读数范围在0.000到2.000Abs。同一孔平均值,最高值和最低值之间的差值应该在+/一1.0%和+/一0.010OD范围内。

读数范围在2.000到3.000Abs同一孔平均值,最高和最低值之间的差值应在+/一1.0% 和+/一0.005OD值范围内。读数范围在3.000Abs以上时准确度不符合要求。

仪器线性度:仪器的线性度可使用一种溶剂的稀释系列得到。如可在492 nIn处测量在0.1%TWEEN20中的橘黄色甲基的稀释系列,具体方法如下:在参考光密度计上测量被稀释的溶剂,画出OD值对已知浓度的点图,并画出通过这些点的最好的直线。将从系列稀释中测得的吸光度值与该图比较从而计算出各稀释度的浓度。微板中每种稀释度加入250t,-L,对每种稀释至少使用两个样本,以便降低因加样引起的误差。

测量微板使用精确测量模式,利用测量得到的平均OD值和每个样本的已知浓度画一条OD浓度的曲线,从系列稀释中测得的吸光值与该曲线比较从而计算出各稀释度的浓度。对光度记和本仪器,比较计算的浓度,不准确度不应大于以下,使用标准滤光片492nm时吸光度在0.000~2.000Abs+/一1%、2.000~3.000Abs+/一1.5%。使用梯度滤光片492nm时,吸光度在0.000~2.500Abs+/一2%。